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植物从生长土壤中吸收的磷素磷,大部分迅速转化为有机磷,养分其余部分仍以水溶性确留在输导组织,速测这部分水溶性磷含是钼蓝大体能反映土壤磷素供应状况。因此,比色将植物组织进行压汁或用浸提剂提取来测定这部分磷含量,磷素可评估植株的养分磷素营养状况。
1、速测方法原理
在酸性条件下,钼蓝植株组织或汁液中的比色水溶性磷与钼酸形成磷钼酸,在氯化亚锡或其它还原剂作用下,磷素形成磷钼蓝,养分其蓝色的速测深浅与浸出液中的含磷量在一定范围内成正比。
2、钼蓝仪器设备
剪刀;压汁器;试剂瓶;滴管;刻度吸管;滤纸;纱布;塑料袋。比色
(1)钼酸铵-盐酸溶液:称1.5g钼酸铵[(NH4)6Mo7024·4H20]溶于约30 mL温水中,冷却后,缓缓加入浓盐酸30mL,边加边搅拌,用水稀释至100 mL,贮于棕色瓶中。
(2)试管法氯化亚锡甘油溶液:称氯化亚锡(SnCl2·2H20)1.25g,加浓盐酸5 mL,待溶解后再加甘油[丙三醇,CH2(OH)CH(OH)CH2(OH)]95mL,混匀,贮于棕色瓶中。存放阴凉处,可保存6个月左右。
(3)点滴法用氯化亚锡甘油溶液:取上述氯化亚锡甘油液(试剂2)1份,加甘油1.5份混合均匀备用。
(4)磷标准溶液:称0.7030g磷酸二氢钾(KH2 PO,)溶于400mL蒸馏水中,加入6N硫酸溶液30mL,混匀,用蒸馏水定容至1000mL,即得p(P)=160mg·L-1磷标准溶液。用此标准磷溶液稀释成系列浓度为0mg·L-1,20mg·L-1,40mg·L-1,80mg·L-1,160mg·L-1的磷标准溶液.各取1滴与待测作物组织液相同的方法显色,即成0mg·L-1,0mg·L-1,0.4mg·L-1,0.8mg·L-1,1.6mg·L-1磷标准色阶。据此磷标准色阶,也可用相对稳定的蓝色染料制成比色卡,作为比色标准。
4、操作步骤
选代表性植株,取其灵敏部位(叶柄或叶鞘或茎节)剪碎榨汁待用或称取一定量剪碎混匀的组织,用水浸提组织中的水溶性磷进行测定。
(1)试纸点滴法:将榨取的汁液稀释4倍待用。取1滴盐酸-钼酸铵于普通滤纸条上,再滴1滴稀释的组织汁液于盐酸-钼酸铵的样点上,最后加1滴试纸点滴法用的氯化亚锡廿油,5min后观颜色变化,与同样显色的标准色阶或比色卡比较,定出汁液含磷的高、中、低。
(2)试管比色法于直径15mm的 10mL刻度试管中,加入4mL蒸馏水,滴入1滴榨取的原汁液,摇匀后加入1mL钼酸铵-盐酸溶液,摇匀,再加试管法氯化亚锡甘油液1滴,再摇匀,5min~15 min内与同时显色的标准色阶比较或用试管法比色卡比较定量。
5、结果计算
植株汁液含磷量mg·L-1=p×V1/V2;
式中:p——标准色阶磷mg·L-1或相当的比色卡磷mg·L-1;
V1——显色溶液的毫升数;
V2——显色汁液的毫升数(以每滴相当于0.05 mL计)。
试纸点滴法,可依据绘制的比色卡或磷的标准色阶进行比较定出汁液磷含量的高、中、低。
6、结果解释
不同作物、不同生育期,植株组织磷素含量都有差异,应根据其体情况,找出更为适宜的植株磷素营养指标。同时,采用不同的速测方法,甚至不同的操作步骤,所获得测定位各不相同,因此,不同方法得到的测定值对磷素营业状况分级不可能是一样的。表50-12所示数值是水稻分蘖期茎基部(包括部分未抽出的茎叶),剪碎榨汁用试管比色法测定稻株磷素状况分级。供参考。
参考资料:土壤农业化学分析方法
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